Once we go on the air, there will be no stopping for mistakes.

on 在这里表示"处于某种状态或活动中"。 the 是定冠词，特指某个特定的事物或情况。 air 本义是"空气"，在这里特指"广播、电视信号"的传播媒介。 on the air 是一个固定短语，意思是"正在广播/直播中"，指节目正在通过电视或电台播出。